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H1高效細胞電轉染儀_國產好儀器
[ 瀏覽點擊:319 ] [ 發布時間:2016-09-27 ] 字體:[ ] [ 返回 ]

H1高效細胞電轉染儀



如何定義細胞轉染?

采用 一定的方法將外源遺傳物質,如DNA\RNA等導入特定細胞,使其在細胞內發揮生物學作用。


為什么幾乎所有實驗室都可能用到轉染技術?

全面的分子生物學研究時代到來,而轉染技術是連接分子生物學和細胞生物學研究的橋梁。


轉染技術的應用

機理性研究:基因功能研究、基因表達調控研究

轉基因技術

基因藥物的研究(靶向藥)

基因免疫(細胞免疫治療、核酸疫苗)



電轉染基本原理


對細胞施加一個瞬時的電場

電場改變細胞膜磷脂雙分子層通透性,形成瞬時小孔

外源物質通過瞬時小孔進入細胞內部

目前兩類不同技術路線方波電轉儀

電轉杯式

以Bio-Rad Gene Pulser 為代表


非電轉杯式

以壹達 X-Porator H1為代表

電轉杯式一般操作流程

1、細胞處理(包括消化、電轉Buffer潤洗)。

2、按濃度要求準備定量的細胞、質粒和buffer。

3、將細胞、質粒、buffer混入電轉杯,密封好。

4、將電轉杯插入設備,設置參數并電轉。

電轉杯的一些固有缺陷

●兩片電極式電轉杯,為保證轉染體積,正負極之間距離相對較大,需高電壓轉染,傷害細胞。體積和電壓互為矛盾。

電解溶液在兩極產生氣泡,導致正負極之間電場不均勻。造成無效體積或細胞死亡。

電解現象同時會產生的大量OH根離子,傷害細胞。

非電轉杯式

電極間距極小,低電壓即可完成穿孔,相對低的電流對細胞傷害較小。

電極正負極性輪轉產生的電場,可消除電解效應:

       1、不產生OH根離子改變PH,保護細胞。

       2、不產生氣泡,保證電場穩定均勻。

3、適用的細胞濃度的范圍很寬。

4、單孔處理量大大高于電轉杯:解決了后續實驗的樣品均一性問題。

H1電轉儀三方面突出優勢

一、完全自主知識產權和設計的電場模式帶來的一系列進步

二、操作簡單,上手快,大大縮短實驗所需時間。

三、使用成本低廉。

簡單實驗步驟

準備:養細胞,質粒抽提,buffer的準備

進行實驗:細胞處理——洗去原有含血清培養基——加入buffer、質粒吹打均勻——電轉——直接加入培養基——培養箱內培養

注:電轉完可直接加入培養基進行培養,無需類似其他電轉儀,需要去除電解液等步驟

專用軟件

智能軟件管理標準,可保存私人參數和歷史參數。

廠家提供經驗參數并可終身免費升級。

實驗界面簡潔直觀,可靈活切換預設參數。

具有程序組功能,使參數組合更靈活多變。


選擇壹達H1電轉染儀


單孔轉染量可達10^8——節省實驗成本,節約實驗時間


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